在色譜分析的日常工作中，最讓人撓頭的不是峰分不開，而是遇到“靈異事件"。明明一直都是A峰在前、B峰在后，為了優(yōu)化分離度微調(diào)了一下流動(dòng)相，A和B居然在圖譜上出峰順序居然反過來(lái)了。

這種現(xiàn)象常讓很多實(shí)驗(yàn)員懷疑是不是儀器進(jìn)樣閥出現(xiàn)問題了，或者是樣品貼錯(cuò)了標(biāo)簽，但一看譜圖，又是正確的。其實(shí)，這真不是儀器“鬧鬼"，而是流動(dòng)相的微小改變，影響了目標(biāo)物在色譜柱里的色譜行為。

無(wú)論是改變 pH 引起電離狀態(tài)變化，還是切換甲醇/乙腈改變氫鍵作用，亦或是加入緩沖鹽，都會(huì)讓化合物在固定相和流動(dòng)相之間的分配系數(shù)重新洗牌。

如果在分析過程中，需要找試劑的“平替"，需要我們實(shí)事求是，而遇到出峰順序反轉(zhuǎn)也別慌，先對(duì)化合物結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析，再對(duì)影響出峰時(shí)間的關(guān)鍵因素進(jìn)行排查，答案也能水落石出。